(1) 分子生物学研究进展：汉坦病毒属（Hantaan vims)是 布尼亚病毒科的一个新属，包括肾综合征出血热（HFRS)病原 体、汉坦病毒肺综合征（HPS)的病原体等。

病毒的一般特性：成熟的病毒颗料呈圆形、卵圆形或长形 (76〜210nm大小不等的多形态性），平均直径为122rm^病毒 外膜为双层膜（单位膜），包膜上附着一层短丛状纤突，负染电 镜下病毒颗粒表面构成无数规则的方栅格状图形。

  病毒核衣壳 (nucleocapsid)由颗粒-丝状的内部核蛋白组成。病毒基因组为

负性单链RNA，含大（L)、中（M)、小（S)三个基因片段， 分别编码L蛋白（RNA多聚酶）、外膜结构蛋白（糖蛋白^和 G2)及核蛋白（NP)，总分子量为4。

  5 x10s。

病毒的基因组各基因片段的特征（以汉坦病毒76-118株为 例说明）：

S基因片段特征：①从病毒cDNA (5^-3')副本演化而来 的病毒RNA序列含单一开放读码框架，含1696个核苷酸，从

第37〜39碱基（起始密码）到第1322〜1324碱基（终止密码）， 共编码429个氨基酸多肽，分子量为48。

  1

xlO4。与5'端22个 碱基有20个互补，碱基组成为：A 26。7%，C 23。8%, G 19。2%，U (T) 30。4%;②S片段基因除编码一个48 xlO3的 核蛋白的开放读码框架之外，在终止密码后，依然存在着约 300bP左右的可编码区，可编码至少产生48个氨基酸多肽；③ 与其他血清型病毒株的S片段比较，同源性大于60%，同源性 主要集中在5'端和3'端，而中段保守性差。

M基因片段特性：①M片段由3616个核苷酸组成，其^端 与5'端的18个氨基酸完全互补，形成手柄状（或干茎状）二级

结构，碱基组成为：A 29。9%，G 17。9%，C 21。9%，U (T) 30。8%;②病毒互补cDNA链为一长的幵放读码框架，从第41 〜43个碱基起始密码（ATG)至第3371〜3373个终止密码 (TAG),共编码1135个氨基酸，即126 xlO3个多肽；③对病毒 糖蛋白G和G2的氨基酸序列分析研究表明，病毒互补RNA (mRNA)的基因排列序列为5, - - G2 - 3，；④G!、G2的N 端和C端及其基因排列与氨基酸分析结果显示，的N端约从

第19位氨基酸开始，C端位于第588〜614位氨基酸；02的~ 端始于第649位氨基酸，至C端在1127〜1135位氨基酸。

  由此 推测和G2糖蛋白的分子量分别为64 x 103和53。7 x 103。

L基因片段特征：L基因片段全长6。5 x lO3左右，即6530 〜6550个核苷酸，编码2〗50~2156个氨基酸多肽，分子量约为 24。6 x 104。L蛋白为汉坦病毒多聚酶，与病毒RNA复制和转录 作用有关。

病毒编码或诱生的蛋白质：汉坦病毒RNA基因组3个不同 的基因片段，分别编码4种不同的病毒结构蛋白：核蛋白，Cn、 02糖蛋白及L多聚酶蛋白。

① 蛋白表达策略及功能•。核蛋白：核蛋白是由病毒互补的 mRNA翻译而成。汉坦病毒核蛋白的功能尚不清楚；G,、G2糖 蛋白：汉坦病毒M片段编码心、G2外膜糖蛋白。

  汉坦病毒 的N端前有两个可能的翻译起始位点，其中第一个UTG (ATG) 在SR22及NE株等病毒M片段开放读码框架上也是固定的。G2 蛋白被认为是聚蛋白前体加工而成。G2蛋白合成的机理为内起 始翻译。（internal

initiation of translation)。

  在 M 基因框架内具有 起始G2蛋白合成的ATG密码。外膜糖蛋白对汉坦病毒感染的 免疫保护作用是肯定的。现已发现某些Gi和G2单克隆抗体有 中和病毒感染性及被动保护动物免受感染，表明体液免疫反应对 机体的保护也是重要的。

② 利用表达单克隆抗体研究病毒结构蛋向的功能及结构蛋白 抗原位点分析：应用病毒单克隆抗体研究发现，针对病毒糖蛋白 ^和单克隆抗体多数具有不同程度的中和活性或血凝抑制活 性（两者均有或其中一种）；而针对核蛋白的单克隆抗体大多数

既无中和活性，也无血凝抑制活性，表明病毒蛋白的中和抗原决 定簇和HA主要存在于外膜糖蛋白和G2上。

  单克隆抗体交叉 反应研究表明，（单克隆抗体的中和作用多针对本型或本株的， 而G2单克隆抗体中和活性和血凝活性可针对多型病毒或毒株，

即q主要表现型或株的中和抗原，而G2表现为组特异性中和 抗原和血凝活性。

(2) 汉坦病毒的分型：g前，国内外学者应用空斑减少中和 试验（PRNT)、微量细胞病变中和试验（MCPENT)、逆转录- 聚合酶链式反应（RT-PCR)和酶切分析、单克隆抗体技术、 寡核苷酸指纹图及核苷酸序列分析、放射免疫沉淀（RIP)和蛋 白印迹试验（Western-blot)、血凝抑制试验（HI)、反向被动 血凝抑制试验（RPHI)、免疫酶斑点法（IEDA)及酶联免疫吸 附试验（EIJSA)等技术，对不同来源的汉坦病毒进行分型研 究，发现汉坦病毒至少有9种血清型，分别来自不同种类宿主动 物，抗原性有明显的差异。

(3) 两种新的导致人类疾病的汉坦病毒的发现：1993年舂 末夏初，在美国西南部的新墨西哥州、科罗拉多州、犹他州和亚

利桑那州四州交界地区（four corners

region )爆发了一种新的疾 病，该病主要临床表现为发热、呼吸衰竭及休克，多数病人在发

病数天后死亡，病死率高达60%。

  同年6月，研究人员用IFA

和ELISA方法从患者血清中检测出可以和汉坦病毒抗原有交叉 反应的IgG和IgM抗体。研究人员根据PUU和PH病毒的核苷 酸序列设计引物，用套式PCR方法，从患者的肺脏和其他组织

中扩增到汉坦病毒的核苷酸序列，证实了血清学的结果。

  进一步 对PCR产物进行序列测定证实，此次爆发的疾病由一种新的汉

坦病毒引起。流行病学研究发现，鹿鼠（deer

mouse, peromusci^maTiici^ato)是这种汉坦病毒的主要宿主动物，该

地区鹿鼠中汉坦病毒抗体阳性率很高。

  应用Vero-E6细胞从鹿 鼠和病人尸解标本中分离到病毒。该病毒最初以发现地区命名为 四角病毒（four comers virus, FCV)，后将FCV重新命名为sin nombre virus (SNV)，即无名病毒。由该病毒引起的疾病命名为

汉坦病毒肺综合征（Hantavirus

pulmonary syndrome, HPS)。

另一新发现的汉坦病毒是多布拉伐/贝尔格莱德病毒（Do-

brava/Belgrade virus)。该病毒与汉滩病毒明显不同，宿主动物亦

为黑线姬鼠，是南斯拉夫重型HFRS的病原。